液氮罐的使用与保管
  一、使用前的检查
液氮罐在充填液氮之前，首先要检查外壳有无凹陷，真空排气口是否完好。若被碰坏，真空度则会降低，严重时进气不能保温，这样罐上部会结霜，液氮损耗大，失去继续使用的价值。其次，检查罐的内部，若有异物，必须取出，以防内胆被腐蚀。
    二、液氮的充填
    填充液氮时要小心谨慎。对于新罐或处于干燥状态的罐一定要缓慢填充并进行预冷，以防降温太快损坏内胆，减少使用年限。充填液氮时不要将液氮倒在真空排气口上，以免造成真空度下降。盖塞是用绝热材料制造的，既能防止液氮蒸发，也能起到固定提筒的作用，所以开关时要尽量减少磨损，以延长使用寿命。
    三、使用过程中的检查
    使用过程中要经常检查。可以用眼观测也可以用手触摸外壳，若发现外表挂霜，应停止使用；特别是颈管内壁附霜结冰时不宜用小刀去刮，以防颈管内壁受到破坏，造成真空不良，而是应将液氮取出，让其自然融化。
    四、液氮罐的放置
    液氮罐要存放在通风良好的阴凉处，不要在太阳光下直晒。由于其制造精密及其固有特性，无论在使用或存放时，液氮罐均不准倾斜、横放、倒置、堆压、相互撞击或与其他物件碰撞，要做到轻拿轻放并始终保持直立。
    五、液氮罐的清洗
    液氮罐闲置不用时，要用清水冲洗干净，将水排净，用鼓风机吹干，常温下放置待用。液氮罐内的液氮挥发完后，所剩遗漏物质(如冷冻精子)很快融化，变成液态物质而附在内胆上，会对铝合金的内胆造成腐蚀，若形成空洞，液氮罐就会报废，因此液氮罐内液氮耗尽后对罐子进行刷洗是十分必要的。具体的刷洗办法如下：首先把液氮罐内提筒取出，液氮移出，放置2—3天，待罐内温度上升到0℃左右，再倒人30℃左右的温水，用布擦洗。若发现个别融化物质粘在内胆底上，一定要细心洗刷干净。然后再用清水冲洗数次，之后倒置液氮罐，放在室内安全不宜翻倒处，自然风干，或如前所述用鼓风机风干。注意在整个刷洗过程中，动作要轻慢，倒人水的温度不可超过40℃，总重不要超过2kg为宜。
    六、液氮罐的安全运输
液氮罐在运输过程中必须装在木架内垫好软垫，并固定好。罐与罐之间要用填充物隔开，防止颠簸撞击，严防倾倒。装卸车时要严防液氮罐碰击，更不能在地上随意拖拉，以免减少液氮罐的使用寿命。
液氮罐是高度真空的冷藏器。在使用和保养液氮罐时必须掌握以下几点：
1、 液氮罐在使用前，应先注入少量液氮使之预冷，在罐内温度达到液氮温度时，充入液氮直至满罐。液氮罐要轻拿轻放，防止碰撞挤压，移动时不可在地面拖拉，要抬起来。平时要存放在干燥、通风良好的房间，防止潮湿。
2、 在保存冷冻精液时，罐内要经常保持一定容量的液氮，以冻精完全浸泡在液氮中为宜。液氮量的测量有两种方法：
2.1 木尺测量法
　　取一根直径5cm、长80cm的木棍，去皮后涂上黑色，然后自一端开始每隔5cm设一刻度，测量时，将零刻度朝下，自液氮罐口插到罐底，经5～10S取出，结霜的长度即为罐内液氮容量，如罐内液氮容量不足总容量的1/3时，应补充液氮。
2.2 测重法
　　先称出空罐的重量，再称出注满液氮时的重量，然后减去空罐的重量，即得罐内液氮的总重量，以后每隔3～5d称一次液氮罐的重量，当罐内液氮的重量低于液氮总重量的1/3时，即应充氮。
3、 要随时检查颈塞和颈塞小沟，及时除掉颈塞上的结冰，颈塞上不能放置塑料布等物质，增加封闭性，保证液氮罐的使用性能。当发现液氮消耗速度过快或在液氮罐颈口的周围附有水珠、出现白霜时，即表示罐的绝缘性能失调，不能保存液氮。
4、 液氮罐内放置标本要做好标记，取放时要稳、准、快。
5、 液氮罐的内腔每年要清洗一次，以防腐蚀罐壁，清洗前要将罐内的液氮放干，并在室内停放2～3d预热到室温后，用中性洗衣粉刷洗，再用清水冲洗干净控干，清洗液和清水的温度不宜超过40℃，防止过热影响罐的性能。
6、 液氮罐要尽量减少运输和开盖的次数。如需运输，一定要用绳索固定在车箱上，保持直立，严防摔撞、倒覆、横卧，尽量防止剧烈震动。
液氮的安全使用
液氮（Liquid nitrogen）是一种特殊的产业制成品，广泛应用于精密仪表制造和医药、食品等工农业生产、日常生活，主要是冷冻贮存媒介。液氮来源于空气，空气中所含主要气体成分为氧气和氮气，其中，氮气约占空气的78．09％。液氮即为液化的氮气。
　　1、液氮特性：液氮由于是由氮气压缩冷却的液体，其理化性质比较特殊。主要特性如下：
　　①超低温性：液氮的沸点为－195．8，液氮气化时每公斤可吸热48大卡。
　　②液氮是无色、无臭、无毒的液体。
　　 ③液氮的渗透性很弱，但当人体皮肤接触液氮时会受到严重冻伤。
　　 ④膨胀性：液氮是由空气压缩冷却制成，其气化时能恢复为氮气。据测每一立升液氮气化，温度上升15℃，体积膨胀约为180倍。
　　⑤窒息性：氮气本身不能致使人窒息，但在一定空间内，假如氮气过多而隔尽氧气，操纵者也会引起窒息。据测定，10公斤液氮在10立方米的室内瞬间蒸发，可使空间氧气忽然降到13％，造成空间缺氧。在此条件下，就能引起人的窒息乃至死亡。
　　2、液氮贮存：液氮贮存种类一般可分为贮存罐、运输罐两种。贮存罐主要用于室内液氮的静置贮存，不宜在工作状态下作远间隔运输使用；为了满足运输条件，运输罐主要有专项防震设计，除静置贮存外，还可在充装液氮状态下，作运输使用，但应避免剧烈的碰撞和震动；另外，在短时间、短间隔内使用少量液氮时，也可以临时使用保温瓶（杯）等用具存放，但在用保温瓶（杯）等物贮存时，必须在瓶塞边沿切开一条牙签样大小的小沟，以便氮气的安全排出。
3、液氮的安全使用：正常情况下，液氮贮存在密封式罐体时，要留意将液氮罐口保存一定缝隙，否则液氮气化时气体无法及时排出，极易造成爆炸事故。一般液氮罐的盖塞都留有一定的缝隙，在使用时千万不要人为将其堵塞。
　 ⑴液氮使用留意事项： ①液氮是低温制品，在使用过程中要防止冻伤。 ②在液氮中操纵及存取冷冻物品时速度要快，留意轻拿轻放，以免物品解冻，造成不必要的损失。 ③在使用和贮存液氮的房间内，要保持透风良好，以避免空间缺氧，造成职员窒息。 ④由于液氮不具有杀菌性，故接触液氮的用具要留意消毒。 ⑤液氮罐在运输过程中一定要固定好，以防震动和倒翻。 ⑥液氮罐长期贮存物品时，要留意及时补充液氮。
　　⑵容器的使用维护: ①在使用过程中，天天都应随时检查罐体的使用情况，发现罐体瓶盖上或上部有水珠和结霜情况，说明罐体质量有题目，应立即停止使用；在罐体无水珠或结霜现象时，可以用手触摸外壳 ，若感觉上部冷，下部热，这也说明罐体质量有一定的题目，即液氮日增损较大，应留意观察，防止液氮耗损，最好停止使用；同时在日常使用过程中，还要参照相关压力容器安全技术监察规程要求，定期对液氮罐及安全设施仪表附件进行检测校验，确保其安全完好。 ②使用前要认真检查容器相关安全仪表和附件，当仪表、附件处于完好的正常状态下，才能正确把握和调整其所需压力和容量； 若发现外表挂霜，应立即停止使用，及时检验检测和维修。 ③液氮罐在充填液氮之前，首先要检查外壳有无凹陷，真空排气口是否完好；若被碰坏，真空度则会降低，严重时进气不能保温，这样罐体上部就会结霜，液氮损耗大，会失往继续使用的价值；充填液氮时更不能将液氮倒在真空排气口，以免造成真空度下降；同时，充填液氮前罐内要有少量液氮保持预冷状态。 ④液氮罐要存放在透风良好的阴凉处，不要在太阳光下暴晒。由于其制造精密及固有的特性，无论在使用或存放时，严禁液氮罐倾斜、横放、颠倒、堆压、相互撞击或与其他物件碰撞，要始终保持罐体竖立。 ⑤用于长期贮存时，则需要定期补充液氮，补充时一般应在液氮剩余量为总容量的三分之一为宜。 ⑥放进或取出冷冻物品时，要尽量使罐口打开时间短，以减少液氮消耗，也不要把提筒完全提出来。 ⑦严禁在容器盖上放置物体和密封颈口。 ⑧严禁用硬物清除颈管内的冻霜，以免损伤颈管。 ⑨液氮罐只用于艳服液氮，不答应艳服其他液体或混存。
　　⑶运输: ①运输时应使用海棉或其它软垫物品对液氮罐加以固定，预防翻倒。 ②正确选用运输罐(YDS-XB)，禁止使用贮存罐作运输罐用。

液氮罐在生物学实验中的应用
 
一、在细胞培养过程中的使用
    细胞培养的一般过程，主要包括准备、取材、培养和冻存复苏4步。为保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般用一196℃液氮温度，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂(一般为二甲基亚砜或甘油)的培养基，以一定的冷却速度冻存，最终保存于液氮中。在极低的温度下，细胞保存的时间几乎是无限的。
二、胚胎冷冻保存技术
    胚胎冷冻保存技术是指在低温条件下利用低温保护剂保存胚胎的一门技术。这一技术是20世纪后半叶随着人工授精技术广泛应用而产生的，目前已成为了现代生命科学研究必备的手段之一。动物胚胎的冷冻保存原理就是因为低温降低了胚胎内的变质反应速度，温度越低，胚胎保存时间就越长。
    目前已研究出多种胚胎冷冻保存方法，包括慢速冷冻法、快速冷冻法、一步冷冻法、直接移植冷冻法和玻璃化冷冻法等。其中玻璃化冷冻法的步骤如下：
    ①将胚胎在室温下放人25％玻璃化溶液(VS液)中预处理15min；
    ②将预处理后的胚胎放在高浓度(75％一90％)的VS液中保存20—40min；
    ③将经过两步抗冻剂处理的胚胎直接投入液氮中保存。